Grundlæggende introduktion
Erytrocytlysat er en af de mest enkle og nemme metoder til at fjerne røde blodlegemer, det vil sige at spalte røde blodlegemer med lysat, som ikke beskadiger kerneceller og fuldt ud kan fjerne røde blodlegemer. Lysatspaltning er en mild metode til fjernelse af røde blodlegemer, som hovedsageligt anvendes til adskillelse og rensning af vævsceller spredt ved enzymfordøjelse, adskillelse og oprensning af lymfocytter og fjernelse af røde blodlegemer i eksperimenterne med vævsprotein og nukleinsyre. syreekstraktion. De vævsceller, der opnås ved lysatet af røde blodlegemer, indeholder ikke røde blodlegemer, og kan yderligere bruges til primær kultur, cellefusion, flowcytometri, separation og ekstraktion af nukleinsyre og protein mv.
Brugsanvisning
Vævscelleprøve
1. Frisk væv blev fordøjet med pancreas/enzym eller collagenase og dispergeret i enkeltcellesuspension, og supernatanten blev kasseret ved centrifugering.
2. Tag ELS-lysat fra køleskabet ved 4â, tilsæt ELS-lysat til cellepræcipitatet i forholdet 1:3-5 (tilsæt 3-5 ml lysat til 1 ml cellekomprimeret), blæs forsigtigt og bland.
3. Centrifuger ved 800-1000 rpm i 5-8 minutter og kassér den øverste røde klare væske.
4. Den udfældede del blev opsamlet og centrifugeret med Hanks opløsning eller serumfri kulturopløsning i 2-3 gange.
5, hvis revnedannelsen ikke er fuldstændig/fuldstændig kan trin 2 og 3 gentages.
6. Resuspensionsceller til efterfølgende eksperimenter; Hvis RNA ekstraheres, er det bedst at gøre det i opløsningen fremstillet fra trin 4 med DEPC-vand
Røde blodlegemer har en meget kort livscyklus, kun 120 dage, men de reproducerer blod meget hurtigt, og i dette tilfælde er de særligt i stand til celledeling, og de er de hurtigst delende celler af alle, så denne celle er meget værdifuld, så det er meget nyttigt til cellekultur. Det er meget enkelt, det har ingen organeller i sig, kun cellemembraner og proteiner.